(유세포분석기, FCM)은 염색된 세포 마커의 형광 강도를 측정하는 세포 분석기입니다. 단일 세포의 분석 및 분류를 기반으로 개발된 첨단 기술입니다. 세포의 크기, 내부 구조, DNA, RNA, 단백질, 항원 및 기타 물리적 또는 화학적 특성을 빠르게 측정하고 분류할 수 있으며, 이러한 분류의 수집을 기반으로 할 수 있습니다.
유세포 분석기는 주로 다음의 5가지 부분으로 구성됩니다.
1 유동 챔버 및 유체 시스템
2 레이저 광원 및 빔 형성 시스템
3 광학 시스템
4 전자, 저장, 디스플레이 및 분석 시스템
5셀 분류 시스템
그중에서도 레이저 광원 및 빔 형성 시스템에서 레이저 여기는 유세포 분석에서 형광 신호의 주요 측정 기준입니다. 여기광의 세기와 노출 시간은 형광 신호의 세기와 관련이 있습니다. 레이저는 단일 파장, 고강도, 고안정성 조명을 제공할 수 있는 가간섭성 광원입니다. 따라서 이러한 요건을 충족하는 이상적인 여기 광원입니다.
레이저 광원과 유동 챔버 사이에는 두 개의 원통형 렌즈가 있습니다. 이 렌즈들은 레이저 광원에서 방출된 원형 단면의 레이저 빔을 더 작은 단면적(22μm × 66μm)의 타원형 빔으로 집속시킵니다. 이 타원형 빔 내의 레이저 에너지는 정규 분포에 따라 분포되어 레이저 감지 영역을 통과하는 세포에 일정한 조도를 보장합니다. 한편, 광학 시스템은 여러 세트의 렌즈, 핀홀, 필터로 구성되며, 이는 크게 유동 챔버의 상류와 하류의 두 그룹으로 나눌 수 있습니다.
유동 챔버 전면의 광학 시스템은 렌즈와 핀홀로 구성됩니다. 렌즈와 핀홀(일반적으로 렌즈 두 개와 핀홀 하나)의 주요 기능은 레이저 광원에서 방출된 원형 단면의 레이저 빔을 더 작은 단면을 가진 타원형 빔으로 집중시키는 것입니다. 이를 통해 레이저 에너지가 정규 분포에 따라 분배되어 레이저 감지 영역 전체의 세포에 일관된 조도를 제공하고 미광으로 인한 간섭을 최소화합니다.
필터에는 세 가지 주요 유형이 있습니다.
1: 장파장 통과 필터(LPF) - 특정 값보다 높은 파장을 가진 빛만 통과시킵니다.
2: 단거리 통과 필터(SPF) - 특정 값 이하의 파장을 가진 빛만 통과시킵니다.
3: 대역 통과 필터(BPF) - 특정 파장 범위의 빛만 통과시킵니다.
다양한 필터 조합을 통해 각기 다른 파장의 형광 신호를 개별 광전자 증배관(PMT)으로 보낼 수 있습니다. 예를 들어, PMT 앞의 녹색 형광(FITC)을 검출하는 필터는 LPF550과 BPF525입니다. PMT 앞의 주황색-적색 형광(PE)을 검출하는 필터는 LPF600과 BPF575입니다. PMT 앞의 적색 형광(CY5)을 검출하는 필터는 LPF650과 BPF675입니다.
유세포 분석은 주로 세포 분류에 사용됩니다. 컴퓨터 기술의 발전, 면역학의 발전, 그리고 단일클론 항체 기술의 발명으로 생물학, 의학, 약학 및 기타 분야에서 유세포 분석의 응용 분야가 점차 확대되고 있습니다. 이러한 응용 분야에는 세포 역학 분석, 세포 사멸, 세포 유형 분석, 종양 진단, 약물 효능 분석 등이 포함됩니다.
게시 시간: 2023년 9월 21일
